16S FISH檢測 自發(fā)熒光淬滅試劑盒,首發(fā)于微基生物。
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一、自發(fā)熒光淬滅試劑盒產(chǎn)品規(guī)格
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產(chǎn)品規(guī)格 |
組分配置 |
可處理切片數(shù) |
有效期 |
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基礎(chǔ)型(20T) |
熒光淬滅劑 A(2×)11mL 熒光淬滅劑 B(5×)5mL |
20-30張冰凍切片(5-15μm) |
未開封2-8℃避光保存,有效期6個(gè)月 |
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常規(guī)型(50T) |
熒光淬滅劑 A(2×)27mL 熒光淬滅劑 B(5×)12mL |
50-70張冰凍切片(5-15μm) |
未開封2-8℃避光保存,有效期6個(gè)月 |
備注:T表示可處理切片數(shù)量,適配5-15μm常規(guī)冰凍切片厚度。若切片厚度增加,可適當(dāng)增加試劑用量。
二、適用樣本類型及淬滅效果展示
動(dòng)物組織、植物根系等高自發(fā)熒光冷凍切片樣本;
含有外源性熒光雜質(zhì)的石蠟切片樣本。
組織冰凍切片樣本使用自發(fā)熒光淬滅試劑盒淬滅前vs 淬滅后測試效果圖

組織冷凍切片自發(fā)熒光淬滅效果等級評價(jià)
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熒光通道 |
熒光淬滅效果等級 |
說明 |
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FITC 通道 |
▲▲▲▲ |
淬滅后自發(fā)熒光亮度顯著衰減,信號抑制作用突出; |
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Texas Red/CY5通道 |
▲▲▲ |
淬滅后亮度明顯下降,效果相近且較好; |
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DAPI 通道 |
▲▲ |
淬滅后亮度降幅較小,效果最差 |
三、自發(fā)熒光淬滅試劑作用原理
本試劑盒可針對性抑制與清除樣本中引發(fā)自發(fā)熒光的各類物質(zhì):既能作用于內(nèi)源性脂溶性熒光物質(zhì)(如脂褐素)、內(nèi)源性過氧化物酶、膠原纖維、彈性纖維等自身熒光基團(tuán),也可有效去除樣本預(yù)處理過程中產(chǎn)生的外源性非特異性熒光雜質(zhì)(如石蠟微晶、組織固定液殘留熒光物質(zhì))。
試劑盒配備兩種熒光淬滅劑,既可單獨(dú)使用,也可協(xié)同增效,靶向清除自發(fā)熒光成分;全程不干擾探針雜交及后續(xù)熒光信號讀取,不影響實(shí)驗(yàn)核心流程,確保檢測結(jié)果真實(shí)可靠。
三、儲(chǔ)存條件
試劑盒未開封組分:2–8℃冷藏避光保存,嚴(yán)禁冷凍、高溫及強(qiáng)光照射。
嚴(yán)格遵循儲(chǔ)存要求,可有效保證試劑活性與淬滅效果。
配制后的工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用;若短期保存,可密封后于2–8℃冷藏避光儲(chǔ)存,并在48小時(shí)內(nèi)使用完畢。
四、產(chǎn)品優(yōu)勢
多通道兼容:覆蓋FISH檢測常用熒光通道,一站式解決多熒光標(biāo)記樣本的自發(fā)熒光問題;
高效特異性:靶向清除自發(fā)熒光成分,不影響探針與靶標(biāo)結(jié)合,不干擾后續(xù)信號讀取;
適配性廣:適用于動(dòng)植物多類高自發(fā)熒光熒光的冷凍切片和石蠟切片切片,拓展性強(qiáng);
操作靈活:兩種淬滅劑可單獨(dú)/協(xié)同使用,滿足不同樣本和切片類型的處理需求。
獲取產(chǎn)品詳細(xì)說明書、實(shí)驗(yàn)方案及報(bào)價(jià)信息,專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)為您解答實(shí)驗(yàn)難題!咨詢熱線:021-50763698
本產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床診斷
16S FISH檢測 自發(fā)熒光淬滅試劑盒,首發(fā)于微基生物。
]]>高宿主DNA污染微生物樣本檢測服務(wù),首發(fā)于微基生物。
]]>微基生物依托前沿科研成果與技術(shù)積累,搭建了從樣本采集、宿主核酸去除、文庫構(gòu)建、深度測序到生物信息學(xué)分析的全流程優(yōu)化體系,實(shí)現(xiàn)高宿主樣本中微生物的精準(zhǔn)、高靈敏度解析,檢測成功率與數(shù)據(jù)可靠性遠(yuǎn)超行業(yè)平均水平,為科研工作者提供穩(wěn)定、可靠、高靈敏度的專業(yè)檢測服務(wù)。
一、高宿主DNA污染微生物常見樣本類型
臨床樣本:呼吸道樣本(支氣管肺泡灌洗液、痰液、唾液等)、腫瘤組織樣本、皮膚拭子等;
食品樣本:乳品種類、發(fā)酵食品、生鮮食品基質(zhì)樣本等;
環(huán)境樣本:各類含高宿主/宿主類雜質(zhì)的環(huán)境拭子、水體沉積物等;
二、高宿主DNA污染樣本檢測難點(diǎn)
有效測序數(shù)據(jù)利用率極低:宿主DNA占比超90%,微生物序列被大量宿主序列淹沒,導(dǎo)致有效測序數(shù)據(jù)利用率極低,難以捕捉痕量微生物的序列信息。
微生物檢測偏差顯著:宿主DNA干擾會(huì)引發(fā)微生物群落偏差,PCR擴(kuò)增效率低等問題,無法真實(shí)反映樣本中微生物的實(shí)際組成與豐度。
常規(guī)處理方法弊端突出:常規(guī)宿主去除方法操作繁瑣、對樣本要求嚴(yán)苛(如不適用于凍存樣本)、易造成微生物DNA損失、引入系統(tǒng)性偏倚等,嚴(yán)重影響檢測結(jié)果的可靠性。
低生物量樣本測序失敗率高:部分高宿主樣本同時(shí)存在低生物量特征,常規(guī)實(shí)驗(yàn)流程難以滿足文庫構(gòu)建要求,易導(dǎo)致測序?qū)嶒?yàn)失敗。
三、高宿主呼吸道樣本宿主DNA去除方法的科研驗(yàn)證
文獻(xiàn):Host DNA depletion on frozen human respiratory samples enables successful metagenomic sequencing for microbiome studies.
本研究圍繞冷凍無保護(hù)劑的人類呼吸道高宿主樣本開展宿主DNA去除方法的系統(tǒng)評估,為高宿主樣本宏基因組測序提供標(biāo)準(zhǔn)化方案。
1.研究樣本:高宿主冷凍人呼吸道樣本:支氣管肺泡灌洗液(BAL)、鼻拭子、痰液
2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):系統(tǒng)評估lyPMA、Benzonase、HostZERO、MolYsis、QIAamp 5種主流宿主DNA 去除方法的效果,設(shè)置未處理對照組,同時(shí)設(shè)立模擬微生物群落陽性對照、試劑空白陰性對照;通過qPCR定量、深度宏基因組測序、微生物分型、功能預(yù)測、微生物活力驗(yàn)證等多維度分析,結(jié)合因果中介分析、PERMANOVA等統(tǒng)計(jì)方法,全面驗(yàn)證宿主去除方法的效率、特異性、低偏倚性。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
高宿主呼吸道樣本宿主DNA去除實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)框架
本研究對支氣管肺泡灌洗液(BAL)、鼻拭子、痰液三種呼吸道高宿主樣本,設(shè)置未處理對照組與5種宿主DNA去除處理組,同時(shí)設(shè)置模擬群落、試劑陰性對照,通過qPCR、宏基因組測序、微生物分型、功能預(yù)測等多維度分析,驗(yàn)證不同去除方法的效果。
按樣本類型分層的微生物(非病毒)和病毒宿主屬相對讀長豐度圖
A/B:危重患者BAL樣本,A為前10非病毒微生物物種,B為前10病毒宿主屬(以細(xì)菌屬為單位,因DNA病毒多為噬菌體,按宿主屬表征);
C/D:健康成人鼻拭子樣本,C為前10非病毒微生物物種,D 為前10病毒宿主屬;
E/F:pwCF患者痰液樣本,E為前10非病毒微生物物種,F(xiàn)為前10病毒宿主屬;
結(jié)果顯示:宿主DNA去除可有效提升微生物有效測序深度,顯著降低高宿主樣本的測序失敗率,同時(shí)能清晰解析樣本中微生物的群落結(jié)構(gòu)。
按樣本類型和處理方法分層的微生物α/β多樣性圖
A:微生物α多樣性;B:病毒α多樣性,(BAL樣本多數(shù)無病毒讀長,僅展示鼻拭子和痰液);
C:微生物β多樣性,表征處理組與未處理組的群落結(jié)構(gòu)差異;
D:病毒β多樣性,BAL 樣本因病毒檢測失敗未納入。
結(jié)果顯示:宿主DNA去除可顯著提升高宿主樣本的微生物物種豐富度。
微生物(非病毒)和病毒宿主屬的差異豐度火山圖
全樣本水平的非病毒微生物物種(A)和病毒宿主屬(B)差異豐度火山圖
結(jié)果顯示:樣本類型對微生物和病毒豐度的影響遠(yuǎn)大于宿主去除處理,體現(xiàn)出呼吸道微生物群落的固有樣本特異性;宿主去除對部分類群豐度存在物種特異性效應(yīng),且噬菌體與其細(xì)菌宿主的豐度變化無強(qiáng)協(xié)同性,這或與噬菌體分布、細(xì)菌細(xì)胞壁特性相關(guān)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)證實(shí)宿主DNA去除是高宿主呼吸道樣本測序的必要操作,方法選擇需適配樣本類型(QIAamp為通用優(yōu)選),樣本保存處理需注意冷凍保護(hù)與痰液樣本的胞外DNA問題;同時(shí)驗(yàn)證冷凍無保護(hù)劑樣本可實(shí)現(xiàn)高效宿主去除,還確定0.5-2百萬微生物reads為該類樣本測序深度的飽和閾值,為相關(guān)研究提供了實(shí)用方案和參考。
四、微基生物服務(wù)優(yōu)勢:
高成功率:全流程優(yōu)化體系適配各類高宿主樣本,檢測成功率遠(yuǎn)超行業(yè)平均水平,解決低生物量、高宿主樣本測序失敗率高的問題。
高靈敏度:高效宿主去除+深度測序+精準(zhǔn)分析,可捕捉樣本中豐度低至痕量的微生物信號,真實(shí)反映微生物群落組成。
低偏倚:定制化宿主去除方案結(jié)合嚴(yán)格的質(zhì)控體系,最大限度降低微生物DNA損失與群落結(jié)構(gòu)偏倚,檢測結(jié)果更可靠。
強(qiáng)兼容:支持冷凍、FFPE、新鮮等多種保存狀態(tài)的樣本,適配臨床、食品、環(huán)境等多領(lǐng)域研究需求。
全流程服務(wù):提供從樣本采集指導(dǎo)、實(shí)驗(yàn)操作、測序到數(shù)據(jù)分析的一站式服務(wù),配套詳細(xì)的研究報(bào)告,滿足科研論文發(fā)表、課題研究等多種需求。
微基生物始終以科研需求為導(dǎo)向,專注于微生物檢測技術(shù)的創(chuàng)新與科研轉(zhuǎn)化,以專業(yè)的技術(shù)體系、嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)質(zhì)控、個(gè)性化的科研服務(wù),為高宿主DNA污染樣本的微生物組學(xué)研究提供最優(yōu)技術(shù)解決方案,助力科研工作者攻克技術(shù)難點(diǎn)!詳情咨詢:021-50763698.
高宿主DNA污染微生物樣本檢測服務(wù),首發(fā)于微基生物。
]]>痕量/低豐度微生物樣本檢測服務(wù),首發(fā)于微基生物。
]]>針對這類樣本,微基生物建立了專屬的實(shí)驗(yàn)技術(shù)體系和數(shù)據(jù)分析流程,以遠(yuǎn)超行業(yè)平均水平的檢測成功率,為科研工作者提供精準(zhǔn)、可靠的檢測服務(wù)。
一、痕量/低豐度微生物樣本的常見類型
· 人體相關(guān):血液、腦脊液、胎盤、胎兒組織、母乳、呼吸道分泌物等;
· 自然環(huán)境:極地超干旱土壤、深層地下沉積物、飲用水、高空大氣等;
· 其他:植物種子、極端環(huán)境巖石、實(shí)驗(yàn)室潔凈表面等。
二、痕量/低豐度微生物樣本檢測的難點(diǎn)
信號易被污染掩蓋:目標(biāo)微生物DNA/RNA占比極低,甚至低于檢測儀器的基礎(chǔ)識別閾值,少量外源污染即可覆蓋真實(shí)信號。研究顯示,低豐度微生物(相對豐度<1%)檢測誤差率可達(dá)60%以上,甚至?xí)贸鐾耆喾吹奈⑸锒鄻有越Y(jié)論。
樣本價(jià)值極高且不可重復(fù):極端環(huán)境樣本、人體組織樣本等的獲取成本極高,部分樣本無法重復(fù)采集。若因污染導(dǎo)致檢測失敗,會(huì)造成樣本浪費(fèi),實(shí)驗(yàn)成本增加及研究周期延長。
數(shù)據(jù)解讀易誤判:傳統(tǒng)去污染工具難以區(qū)分“既是污染又是樣本原生微生物”的類群,且低生物量樣本的真實(shí)信號與污染信號易重疊,導(dǎo)致誤判或漏判。
低/高生物量環(huán)境微生物細(xì)胞數(shù)量對比圖
三、權(quán)威共識指引:污染防控的核心邏輯
發(fā)布在《Nature Microbiology》上的權(quán)威共識“Guidelines forpreventing and reportingcontamination in low-biomassmicrobiome studies”明確指出,低生物量微生物組研究的核心挑戰(zhàn)是“信號與噪聲的博弈”,污染可能貫穿研究全流程,需從采樣、實(shí)驗(yàn)、分析到報(bào)告建立全鏈條防控體系。
研究全流程污染來源與防控對照示意圖
2.DNA提取階段:試劑、提取設(shè)備可能引入外部污染物,同時(shí)不同樣本間可能發(fā)生交叉污染;
3.文庫制備與測序階段:文庫試劑、測序平臺可能引入污染,還可能出現(xiàn)“標(biāo)簽跳躍”導(dǎo)致的序列錯(cuò)配污染。
防控對照設(shè)計(jì):每個(gè)環(huán)節(jié)均需設(shè)置對應(yīng)對照,且對照需全程跟隨樣本處理流程,確保能精準(zhǔn)定位污染發(fā)生的具體環(huán)節(jié);陰性對照用于識別外源污染(如試劑、環(huán)境),陽性對照用于校準(zhǔn)檢測極限、監(jiān)控交叉污染。
四、痕量微生物樣本:牛乳樣本檢測的污染
《The impact of kit, environment and sampling contamination on the observed microbiome of bovine milk》的研究以14頭健康奶牛為對象,采集腺泡乳、剝離乳、乳頭頂端、乳頭管樣本,同時(shí)設(shè)置空氣空白、采樣空白、提取空白等多重陰性對照,通過兩種算法系統(tǒng)識別污染,其結(jié)果深刻揭示了低生物量樣本檢測的核心問題:
1.75%以上的測序數(shù)據(jù)為污染序列,主要來自DNA提取試劑盒、擠奶廳空氣、乳頭皮膚,而非牛乳本身;
2.不同類型樣本污染路徑存在差異:腺泡乳主要受試劑盒污染,剝離乳是“環(huán)境+采樣+試劑盒”三重污染,乳頭組織則主要被空氣微生物污染;
3.去污染后,牛乳的真實(shí)優(yōu)勢微生物僅為葡萄球菌屬、不動(dòng)桿菌屬,多樣性遠(yuǎn)低于乳頭皮膚,此前許多被認(rèn)為是牛乳原生的微生物(如擬桿菌屬、假單胞菌屬)實(shí)為污染導(dǎo)致的“假陽性”。
牛乳樣本測序數(shù)據(jù)污染占比示意圖
研究顯示75%以上的測序數(shù)據(jù)為污染序列,僅不足25%為牛乳原生微生物序列,直觀印證了低生物量樣本中污染信號對真實(shí)信號的嚴(yán)重掩蓋,也凸顯了精準(zhǔn)去污染的必要性。
牛乳樣本不同污染來源貢獻(xiàn)占比圖
研究顯示不同類型樣本的污染路徑具有顯著特異性:腺泡乳主要受DNA提取試劑盒污染(占比7.6%),剝離乳受空氣(11.7%)、采樣工具(5.1%)、試劑盒(4.7%)三重污染,乳頭組織則以空氣微生物污染為主(平均38.3%),為針對性設(shè)計(jì)污染防控方案提供了實(shí)證依據(jù)。
去污染前后牛乳微生物組多樣性對比圖
研究顯示:去污染后,牛乳的優(yōu)勢微生物僅為葡萄球菌屬(4.9%)、不動(dòng)桿菌屬(4.2%),多樣性遠(yuǎn)低于乳頭皮膚樣本;此前許多被認(rèn)為是牛乳原生的微生物(如擬桿菌屬、假單胞菌屬),實(shí)為污染導(dǎo)致的“假陽性”,說明有效的去污染流程是獲取真實(shí)微生物組信息的關(guān)鍵。
牛乳樣本優(yōu)勢微生物組成對比圖
研究顯示:去污染后,牛乳樣本中葡萄球菌屬、不動(dòng)桿菌屬為核心優(yōu)勢類群,而乳頭皮膚樣本中放線菌屬、棒狀桿菌屬等占比更高,進(jìn)一步印證了低生物量樣本經(jīng)污染去除后,其微生物組成與相鄰環(huán)境樣本存在顯著差異,也體現(xiàn)了精準(zhǔn)去污染對區(qū)分樣本固有微生物組的重要意義。
五、微基生物服務(wù)優(yōu)勢:
檢測成功率行業(yè)領(lǐng)先:針對血液、極地土壤等難處理樣本,檢測成功率遠(yuǎn)超行業(yè)平均水平;
結(jié)果精準(zhǔn)可靠:多技術(shù)交叉驗(yàn)證,污染去除率≥95%,假陽性率顯著低于傳統(tǒng)方法;
個(gè)性化定制:根據(jù)樣本類型、研究目標(biāo)定制實(shí)驗(yàn)方案與分析流程;
全程技術(shù)支持:從樣本采集指導(dǎo)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)到數(shù)據(jù)解讀,提供一對一專業(yè)服務(wù)。
微基生物始終專注于微生物檢測技術(shù)的創(chuàng)新與突破,以專業(yè)技術(shù)、嚴(yán)格質(zhì)控與個(gè)性化服務(wù),為痕量微生物樣本檢測提供優(yōu)質(zhì)解決方案。歡迎科研工作者前來咨詢了解,共同攻克低生物量樣本研究的技術(shù)瓶頸!
痕量/低豐度微生物樣本檢測服務(wù),首發(fā)于微基生物。
]]>微基生物全新推出Olink蛋白組學(xué)檢測服務(wù),依托Olink PEA(鄰位延伸分析)技術(shù)平臺,基于Reveal 1034靶點(diǎn)全景蛋白組檢測與Target 96炎癥panel檢測兩大核心產(chǎn)品,為科研工作者提供高靈敏度、高特異性、高通量的蛋白質(zhì)檢測一體化解決方案。
一、技術(shù)原理:鄰近延伸分析技術(shù)(Proximity Extension Assay,PEA)
鄰位延伸分析(Proximity Extension Assay,PEA)技術(shù),通過雙抗體識別機(jī)制將特異性蛋自信號轉(zhuǎn)化為可指數(shù)級擴(kuò)增的DNA信號,實(shí)現(xiàn)了超高靈敏度與特異性的多重蛋白檢測。從根本上解決了傳統(tǒng)多重蛋白檢測中的交叉反應(yīng)和背景噪音問題。
二、Olink蛋白組學(xué)檢測服務(wù)
(一)Olink Reveal 1034靶點(diǎn)全景蛋白組檢測
1.覆蓋1034種核心蛋白,僅需4μL樣本即可完成檢測
2.四層質(zhì)控體系確保數(shù)據(jù)可信
實(shí)驗(yàn)階段:在孵育/延伸/擴(kuò)增內(nèi)參每個(gè)檢測孔內(nèi)都包含3種獨(dú)立的內(nèi)參,實(shí)時(shí)監(jiān)控免疫反應(yīng)、延伸/文庫擴(kuò)增和信號檢測這三個(gè)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟的完整性。
樣本質(zhì)控:使用混合血樣作為質(zhì)控樣本,用于評估同一批次內(nèi)(intra-batch)和不同批次間(inter-batch)的檢測差異。
(二) Olink Target 96炎癥靶向蛋白檢測
精選92種炎癥核心蛋白,僅需1μL樣本即可完成檢測
(三) Olink蛋白組+微生物組聯(lián)合檢測解決方案
Olink蛋白質(zhì)組學(xué):1034種核心蛋白質(zhì),92種炎癥核心蛋白檢測;
微生物組:16S rDNA測序/宏基因組測序,全面解析微生物群落構(gòu)成;
專業(yè)分析平臺:整合多組學(xué)數(shù)據(jù),實(shí)現(xiàn)蛋白組與微生物組數(shù)據(jù)的聯(lián)合關(guān)聯(lián)分析。
助力多種疾病探索:內(nèi)圈的數(shù)字代表使用該技術(shù)識別,并與英國生物樣本庫(UKBiobank)數(shù)據(jù)比對后已證實(shí)的疾病數(shù)量;外圈則代表了其更廣泛的疾病研究潛力。
微基生物將以專業(yè)的技術(shù)、高效的服務(wù)、可靠的質(zhì)量,助力科研人員在蛋白組學(xué)與微生物組學(xué)交叉領(lǐng)域取得突破性進(jìn)展。無論是獨(dú)立的蛋白檢測需求,還是聯(lián)合組學(xué)的深度探究,我們都能提供精準(zhǔn)匹配的解決方案,讓科研創(chuàng)新更簡單、更高效!
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微生物整體研究方案 免費(fèi)設(shè)計(jì),首發(fā)于微基生物。
]]>免費(fèi)設(shè)計(jì):提供方案提綱
整體定制:提供方案提綱、文獻(xiàn)查詢解析、詳細(xì)項(xiàng)目計(jì)劃書、結(jié)果解讀及方案修改等。

定制化微生物研究整體方案設(shè)計(jì)服務(wù),通過整合16S擴(kuò)增子測序、宏基因組、絕對定量微生物組學(xué)、代謝組、培養(yǎng)組學(xué)、微生物FISH、qPCR/ddPCR及動(dòng)物模型等技術(shù),為客戶提供從樣本采集、保存到實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化的全流程定制化方案。
微生物整體研究方案 免費(fèi)設(shè)計(jì),首發(fā)于微基生物。
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