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      靶向代謝組

      靶向代謝組學(xué)是對(duì)特定的代謝物群進(jìn)行檢測(cè)與分析。分析時(shí)加入了標(biāo)準(zhǔn)品的定量分析,用以對(duì)特定代謝物絕對(duì)濃度的定量檢測(cè)。常規(guī)分析法有氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)和液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS),我們優(yōu)先利用LC-MS的方法進(jìn)行代謝組分析[1],然后通過(guò)與相同分析條件下標(biāo)準(zhǔn)品的分析結(jié)果進(jìn)行比對(duì),最終完成目標(biāo)代謝群定性和定量的分析。

      針對(duì)不同靶向檢測(cè)物,我們制備了多種標(biāo)準(zhǔn)品,可對(duì) 膽汁酸、短鏈脂肪酸、TMAO及相關(guān)代謝物、 氨基酸、脂肪酸、有機(jī)酸、黃酮類(lèi)、 植物激素、 神經(jīng)遞質(zhì)等進(jìn)行靶向檢測(cè)。

       實(shí)驗(yàn)方法

      targeted-m

       結(jié)果展示

      targeted-p1

      校準(zhǔn)曲線(xiàn)和質(zhì)量控制偏差

      targeted-p2

      所有單個(gè)膽汁酸的提取離子色譜(EIC、全譜)

      HS1B HS2B HS3B HS1C HS2C HS3C
      TUDCA 3.76 3.7 2.96 4.5 4.42 3.26
      TLCA 0.335 0.338 0.361 0.233 0.185 0.166
      GHDCA 43.2 41.3 41 56.1 50.2 40.7
      λ-GMCA 2.46 2.49 2.69 3.25 3.06 3.08
      β-MCA 0.545 0.661 0.142 0.112 0.156 0.0744
      DLCA 0.616 0.439 0.417 0.2 0.154 0.0961
      NCA 3.04 2.68 2.61 3.56 3.35 3.17
      7-KDCA 1.39 1.42 1.34 1.44 1.67 1.35
      NDCA 0.195 0.261 0.162 0.409 0.302 0.315
      GLCA 1.69 1.39 1.43 1.33 1.16 1.2
      β-HDCA 0.817 1.22 1.17 0.672 0.37 0.192
      UDCA 30 27.7 29.2 32 28 24.1
      CDCA 69 64.4 71.1 89.5 83.8 67.4
      DCA 32.4 29.3 30.2 35.6 34.8 27.3
      THDCA 2.61 1.75 1.17 3.81 2.5 2.04
      TDCA 10.2 9.23 8.99 12.8 10.7 10.1
      GUDCA 8.37 6.75 7.05 10.9 8.79 7.6
      GCDCA 285 260 256 364 314 267
      GDCA 48 47.1 50.3 63.8 54.2 44.3
      GCA 129 118 125 142 137 135
      UCA 0.917 0.592 0.864 1.18 1.15 1.07
      3β-CA 1.78 2.22 0.923 1.56 1.43 1.32
      α-MCA 0.214 0.607 0.245 0.152 0.127 0.193
      λ-MCA 2.08 2.19 2.16 3.93 3.34 2.61
      CA 83.3 56.4 52.5 54 51.9 46
      ALCA 0.434 1.05 0.654 0.587 0.677 0.637
      ω-TMCA 0.463 0.434 0.4 0.795 0.435 0.542
      TCA 27 26 24.6 35.2 30.5 27.4
      7-KLCA 2.16 2.2 2.49 1.5 1.9 1.38
      APCA 0.475 0.604 0.432 0.416 0.613 0.294
      3-DHCA 0.491 0.336 0.525 0.491 0.336 0.525
      12-DHCA 8.77 8.87 8.47 9.67 12.6 8.19
      TCDCA 60.24 59.3 57.33 36.45 35.65 39.22

      膽汁酸檢測(cè)結(jié)果

      targeted-p3

      代謝物通路分析

       參考文獻(xiàn)

      1 在基于LC-MS的整體代謝組分析過(guò)程中,我們所遇到的問(wèn)題、局限、優(yōu)勢(shì)和未來(lái)展望。 Gika H.G., et al. 2014. LC-MS-based holistic metabolic profiling. Problems, limitations, advantages, and future perspectives. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2014 Sep 1;966:1-6. doi: 10.1016/j.jchromb.2014.01.054. Epub 2014 Feb 8.

      2 代謝組學(xué)在人體腸道微生態(tài)研究中的機(jī)遇和挑戰(zhàn)。Smirnov K.S., et al. 2016. Challenges of metabolomics in human gut microbiota research. Int J Med Microbiol. 2016 Aug;306(5):266-279. doi: 10.1016/j.ijmm.2016.03.006. Epub 2016 Mar 15.

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