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      首頁 > 微生態(tài)研究 > 極端環(huán)境微生物多樣性分析

      極端環(huán)境微生物多樣性分析

        自然界中存在著許多極端環(huán)境,如冰川、火山口、深海等,這些地方不適合人和其他動(dòng)植物的生存,但是卻有大量微生物的存在,這些微生物即為極端微生物。極端微生物主要包括嗜熱菌嗜冷菌、嗜鹽菌、嗜酸菌、嗜堿菌、嗜壓菌、極端厭氧菌等。有些超級(jí)極端微生物還可適應(yīng)多種極端環(huán)境,如嗜酸菌、嗜鹽堿等。
        近年來,科學(xué)家們?cè)诒?、火山、深海等極端環(huán)境中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了新的生命形式,一些獨(dú)具基因類型的極端微生物在這些“生命禁區(qū)”中繁衍生息。由于特殊的生存環(huán)境造就細(xì)胞的復(fù)雜性及其功能的差異性,其科研的價(jià)值和代謝產(chǎn)物作為產(chǎn)品的應(yīng)用前景不可估量,比如低溫酶在食品、藥品保存、運(yùn)輸中的應(yīng)用。
        微基生物采用分子生物學(xué)結(jié)合高通量測(cè)序的方法,可以得到樣品中絕大部分微生物的信息,并通過生信/統(tǒng)計(jì)分析,對(duì)大量數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,找到樣品中微生物群落結(jié)構(gòu)的多樣性,助您完成科研。

      細(xì)菌或原核生物16S rRNA

      真核生物 18S

      古細(xì)菌 16S

      真菌ITS

      功能基因

      • 數(shù)據(jù)庫:Silva,GreenGene,RDP

        收集目前世界上最全面的三大微生物rRNA基因信息數(shù)據(jù)庫。

      • 高通量測(cè)序

        目前市面上常用的用于研究環(huán)境微生物的高通量測(cè)序平臺(tái)有Illumina MiSeq,Roche 454和Ion Torrent PGM。Illumina MiSeq平臺(tái)憑借其測(cè)序讀長長、測(cè)序周期短、通量大等特點(diǎn),成為使用最為普遍的測(cè)序平臺(tái)。

      高通量分析流程:

      HTS

      • 樣品采集及運(yùn)送:

        新鮮樣品:2-3 g

        DNA樣品:濃度大于 10 ng/uL,總量大于500ng 的基因組 DNA。DNA 純度較差或降解嚴(yán)重會(huì)影響后繼的擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。如果方便的話,可提供電子版DNA電泳檢測(cè)照片及 OD260/280

        樣品運(yùn)送:送樣時(shí)采用干冰保存運(yùn)輸;若是距離較遠(yuǎn),建議采用干冰加冰袋的方式,與樣品一起存放于冰盒中。

      生信/統(tǒng)計(jì)分析

      Bioinfor-statistic-analysis-1

       

      案例分析:

      標(biāo)題:北冰洋中心區(qū)新開水域微微型浮游植物優(yōu)勢(shì)地位分析

      extreme environmental microbiology

      分析物種:微微型浮游植物

      高通量測(cè)序平臺(tái):Roche 454

      測(cè)序區(qū)域:18S V4區(qū)

      主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

        微微型浮游植物為該海域的優(yōu)勢(shì)群落,可占葉綠素生物量的44%-80%。青綠藻、硅藻、藍(lán)細(xì)菌、金藻及甲藻為鑒定出的主要光合浮游生物綱,分別占到微微型浮游植物的0–88%, 2–80%, 0–20%, 4–14% 及2–11%。其中真核生物的優(yōu)勢(shì)屬(種)為塔胞藻Pyramimonas (Pyramimonas gelidicola), 微胞藻Micromonas (Micromonas pusilla) 及棕囊藻Phaeocystis。值得注意的是,高通量測(cè)序分析的結(jié)果表明,塔胞藻要比泛北冰洋優(yōu)勢(shì)種微胞藻的相對(duì)豐度高3倍;而Pyramimonas gelidicola也為第一優(yōu)勢(shì)種,要比一直認(rèn)為的北冰洋夏季第一優(yōu)勢(shì)種Micromonas pusilla高1.5倍。典型相關(guān)性分析(CCA)結(jié)果表明:緯度和鹽度是影響微微型浮游植物群落組成及分布的主要因素。

      extreme environmental microbiology 01

      圖1 微微型浮游植物的群落組成及環(huán)境因子分布的CCA展示圖

      extreme environmental microbiology 02

      圖2 微微型浮游植物的群落組成(基于HPLC 色素分析及CHEMTAX方法)

      原文鏈接:http://link.springer.com/article/10.1007/s00300-015-1662-7

      參考文獻(xiàn):
      (Zhang, He et al. 2015)Zhang, F., J. He, L. Lin and H. Jin (2015). “Dominance of picophytoplankton in the newly open surface water of the central Arctic Ocean.” Polar Biology 38(7): 1081-1089.

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